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青霉素是目前常用的抗生素之一，療效高，但較易發生過敏反應后。對青霉素過敏的人，任何年齡、性別、任何給藥途徑（注射、口服、外用等）、任何劑量和任何制劑（鉀鹽、鈉鹽、長效、半合成青霉素等）均可發生過敏反應。過敏反應的發生率達3~6%。
因此，在使用各種劑型的青霉素制劑前，必須先做過敏試驗。結果為陰性者方可用藥，對接受青霉素治療的病員，如停藥3日以上須重新做過敏試驗。過去已肯定有青霉素過敏史者不宜再作過敏試驗。試驗結果為陽性者禁用青霉素。同時在體溫單、醫囑單、門診卡、床頭卡上醒目地注明青霉素陽性反應，并告知病員和家屬。
（1）過敏反應的原因：過敏反應系抗原和抗體在致敏細胞上的相互作用而引起的。青霉素G本身與其所含的高分子聚合體（6—氨基青霉烷酸，即6—APA），降解產物（青霉烯酸、青霉噻唑酸），以及某些霉菌（青霉菌）均可成為半抗原。這些物質進入人體后和蛋白質或多肽分子結合成全抗原，可使T淋巴細胞致敏，從而作用于B淋巴細胞的分化增殖，轉變成漿母細胞和漿細胞，而產生相應的抗體；此種抗體一般為IgE（免疫球蛋白E），它是一種親細胞抗體，可吸附于組織肥大細胞或白細胞（嗜堿性粒細胞）表面，使機體對抗原處于致敏狀態。當機體再次接觸該抗原時，抗原即和肥大細胞及白細胞表面的IgE相結合而發生作用，導致肥大細胞破裂，釋放出組織胺，慢反應物質（SRSA），緩解肽等血管活動性物質，作用于效應器官。
青霉素過敏反應多發生在過去用過青霉素或青霉素接觸者，有變態反應性疾病或有藥物過敏史者，皆易發生過敏反應。但臨床上也有首次用藥，即發生嚴重過敏反應，其原因可能和下列有關：
① 青霉素高分子聚合體（6—APA）性質很穩定，經煮沸滅菌處理后也不易破壞，因而使用注射過青霉素的注射器，是一致敏的來源。
② 青霉素降解產物可以空氣吸入而致敏。
③ 皮膚絲狀菌以及空氣中的某些霉菌可能產生青霉素樣物質。
過敏反應的好發部位分析：肥大細胞多分布于呼吸道、消化道的粘膜和皮下疏松結締組織，尤其是血管周圍，而產生　IgE抗體的漿細胞也多分布在呼吸道、消化道的粘膜固有層和扁桃體等處，故一旦發生過敏反應，抗原作用于有IgE吸附的　　肥大細胞，產生生物活性物質而出現的一系列癥狀表現在這些部位就尤為明顯。例如：反應發生在皮膚可引起蕁麻疹；發生在呼吸道可引起支氣管哮喘和喉頭水腫；發生在消化道可引起腹痛、腹瀉。若全身受影響，則引起過敏性休克。
（2）皮內試驗：
① 皮內試驗藥液的配制：皮內試驗藥液以每毫升含100~500u的青霉素G等生理鹽水溶液，0.lml含10~50u。上海地區規定為20u為注入標準（北京為25u，天津為20u作標準）。具體配制方法如下：
A． 40萬u青霉素瓶內注入2ml等生理鹽水稀釋為每毫升含20萬u。
B． 取0.1ml青霉素溶液加等生理鹽水至1ml，每毫升含2萬u。
C． 取0.1ml青霉素溶液加等生理鹽水至1ml，每毫升含2000u。
D． 取0.1~0.25ml青霉素溶液加等生理鹽水至1ml，每毫升含200~500u。每次配制時均需將溶液混勻。
② 試驗方法：取青霉素試驗液0.1ml（含20~50u），作皮內注射，待20分鐘后觀察結果。
③ 皮內試驗結果判斷：
A． 陰性：皮丘無改變，周圍不紅腫，無紅暈無自覺癥狀。
B． 陽性：局部皮丘隆起，并出現紅暈，硬塊直徑大于1cm。或紅暈周圍有偽促、癢感，嚴重時可出現過敏性休克。
（3）青霉素快速過敏試驗：無須注射，本法操作簡便、無痛，試驗時間短，效果好。
① 原理：青霉素分子結構中的酸根帶負電荷，在水溶液中電離后，其負離子中含致敏原，當直流電通過時，青霉素負離子可能過負極透入皮下，與體內蛋白質結合變成抗原。對青霉素過敏的人，在電極板下的皮膚上可看到陽性反應現象。
② 用物：青霉素過敏反應快速試驗器，青霉素試驗液（每毫升含1萬u），注射用水，0.25%普魯卡因溶液，紗布。
③ 操作方法：
A． 離子導入部的三個頭子分別用雙層紗布包扎，以便吸附試驗液。在前臂內側用注射用水或蒸餾水浸濕的紗布擦凈皮膚（忌用酒精），在電極板負極的方形頭子上滴上配制好的青霉素試驗液1滴，中間圓形正極頭子上滴注射用水1滴，另一圓形正極頭子上滴0.25%普魯卡因試驗液1滴（在注射普魯卡因青霉素時用）。然后將電極板束于前臂內側面，松緊度應適宜。
B． 開啟電源開關，指示燈亮，電流表指示電流需在50~80uA之間，如電流過高或過低可調節電流表旋鈕，電壓維持在9~12V之間。待電流表指針穩定后，開動計時開關5分鐘。當試驗終末時，快速試驗器自動報警，電流隨即中斷，關好開關，取下電極板，觀察反應5分鐘。
④ 皮膚試驗結果判斷：
A． 陰性：試驗處皮膚的充血和壓跡的粘程序，在青霉素及注射用水的電極板下均相同，在1~2分鐘后即消失。全身無反應者為陰性。
B． 陽性：試驗處皮膚出現明顯突起的風團或大丘疹，周圍充血或不充血，部分病員伴有臂部癢、刺、灼、壓等感覺或全身反應，為強陽性。如局部出現皮膚小丘疹、蕁麻疹則為陽性。少數病人皮膚上出現白斑，也為陽性表現。為了防止遲緩反應，須繼續觀察5分鐘，并在注射前再觀察一次。