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精子分析中基于CASA技術的應用指南（一）
原著：ESHRE Andrology Special Interest Group*
一、簡介
本文中包含的建議代表了參加1997年4月3日至6日在意大利的圣米尼亞托舉行的CASA專題討論會中35名代表的一致意見。在專題討論會上提出了數字圖像分析靜態和運動精子的理論和原則，并討論了現在和未來CASA技術的實際應用在研究和臨床中的位置。
我們強烈呼吁CASA的用戶和設備制造商要同樣仔細考慮本文推薦的方法，CASA未來的發展需要各方共同合作。
需要指出的是：所有參加專題討論會的成員都一致同意CASA制造商必須給CASA用戶提供更加全面的培訓和支持計劃。盡管在下面推薦的方法中已經包含這一點，但我們仍然要強調： CASA在臨床應用取得更加深遠的進步之前，CASA技術原理和CASA儀器使用方法的提高培訓是必不可少的。
在以前的ESHRE男科學專門興趣小組開展的專題討論會中就包含了本文中幾種逐字重復的推薦方法。
二、對所有哺乳動物的普遍推薦方法
1、用戶必須認識到：對CASA而言標準化和內外部控制是最重要也是最基本的要求，就像它們在其他男科實驗室診斷程序中的作用一樣。
2、設備制造商被要求提供針對用戶日常使用CASA設備更加廣泛的培訓，而不僅僅是簡單的安裝和設置指令。這種培訓應該包括處理標本的具體建議和分析的準備工作。我們建議CASA制造商應該考慮提供那樣的培訓課程，就像在國內或國際會議中介紹衛星一樣。
3、就像所有的測量系統一樣，用戶的責任是確保取樣取適當數目的細胞。這樣做是為了CASA獲取的結果滿足在統計學上正確解釋的需求，包括敏感性和特異性。如果CASA的原始數據用于臨床決策中，這種方法必不可少。
4、就如先前提出的觀點，影響CASA儀器表現的基本因素是使用者的技術水平。這是強制性的要求，技術人員必須培訓到理解CASA背后的理論和最初的參數設置對產生數據的影響。
5、質量控制(QC)非常重要，每個使用CASA的實驗室必須有質量控制的程序。在檢測精子濃度時建議：超過一定精子濃度范圍時，CASA結果應和改良的Neubauer計數板人工檢測結果直接對比分析。在精子活力分析中，建議準備錄像帶以備使用，或者CASA設備有運動回放功能選項也一樣，在使用正確設置參數情況下確保所有的運動精子被識別出來。最低要求是：當儀器開啟使用和每次運行參數改變后，這些量控制程序應保持運行。所有CASA系統應配置常見的視頻輸入輸出程序允許質量控制(QC)程序以50或60 Hz幀率的錄像。
6、在所有的手稿和報告中，在遵循CASA指南前提下，提出的方法應建立在足夠具體的細節上。這些包括：圖像采集幀率、跟蹤采集圖像時間、采用的平滑算法、觀測精子數、計數板的深度、儀器的模型、軟件版本號、顯微鏡光學原理和放大倍數。
7、計數板深度必須足夠精子無束縛運動。這取決于計數板類型。此外計數板的深度必須匹配合適深度聚焦的光學條件。
8、在所有的CASA的分析中，用戶必須驗證視野中所有運動的精子全部被軟件捕獲跟蹤。